期刊简介
本刊围绕行业与领域、产业与市场、产品与技术,关注食品加工生产到流通销售产业链安全。本着权威、全面、高端、深入的原则,以构筑食吕安全领域技术、知识、信息的传播、交流平台为追求,以成为食品生产加工、流通销售企业的安全顾问为己任,以成为食品安全领域值得信赖的内容与服务提供者为目标,力图为食品行业企业提供全方位的食品安全技术解决方案。杂志读者覆盖食口吃地业所有门类的生产加工企业,流通销售企业,食品原辅料供应企业,包装/加工机械企业,种植养殖企业,食品安全监管、检验、检测、认证、科研、教育培训等机构,政府监管部门等。
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首页>食品安全导刊杂志

- 杂志名称:食品安全导刊杂志
- 主管单位:中国商业联合会
- 主办单位:商业科技质量中心 北京肉类食品协会
- 国际刊号:1674-0270
- 国内刊号:11-5478/R
- 出版周期:旬刊
期刊荣誉:中国期刊全文数据库(CJFD),中国核心期刊遴选数据库期刊收录:维普收录(中), 国家图书馆馆藏, 知网收录(中), 万方收录(中), 上海图书馆馆藏
双重 TaqMan 实时荧光PCR 同时检测沙门氏菌和单核细胞增生李斯特菌方法的建立
窦丽芳;李梦迪;曾爱民
关键词:实时荧光PCR, TaqMan 探针, 方法标准化, 沙门氏菌, 单核细胞增生李斯特菌, iap基因, Fim-Y基因
摘要:以建立沙门氏菌和单核细胞增生李斯特菌双重TaqMan PCR方法为例,阐述TaqMan PCR方法建立的系统步骤和关键要素为目的,采用根据沙门氏菌FimY和单核细胞增生李斯特菌iap基因序列利用ABI primer express 3.0软件设计了物种特异性引物和TaqMan探针,采用标准曲线优化法对双重反应体系中引物和探针、Mg2+、dNTP浓度和Taq酶用量以及热循环条件等关键要素进行了优化,借助单双重PCR比较试验、多重PCR高低丰度模板抑制试验、灵敏度、特异性和重复性试验对建立的方法进行了验证进而得出了这样的结果:我们建立了涵盖设计要素、质控设置、体系优化、评价指标、验证试验共5个关键环节的双重TaqMan 实时荧光PCR方法建立模式。建立的方法灵敏度高,沙门氏菌100CFU/ml,单增750CFU/ml;特异性强,对8种阳性菌株和37种近缘及远缘关系的阴性菌株成功鉴别的方法。本研究可借鉴应用于所有以核酸为检测对象的TaqMan PCR方法的建立模式。
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